LL/2 (LLC1)，ATCC細胞株簡介：

產品名稱：LL/2 (LLC1)

來源：美國ATCC

數量：大量

生長狀態：混合型生長

器官來源：肺

相關疾?。浩渌膊?/span>

品系：BALB/c

是否是腫瘤細胞：0

物種來源：小鼠

運輸方式：凍存運輸

庫存狀態：現貨

復蘇周期：10個工作日左右

美國ATCC品牌介紹：美國菌種保藏中心，又稱美國模式菌種收集中心(ATCC)，是位于馬里蘭洲洛克菲勒的一家私營的，非贏利性組織。目前它可以提供各種動植物細胞、標準品、菌株達兩萬多種。ATCC的成立可追溯到1925年，一個科學委員會認識到科學研究對于微生物的大量需求而萌發了創建一個微生物相關制品供應中心的想法?；鄯f生物通過自己的渠道為國內科研以及生產用戶提供美國ATCC細胞株、菌株等生物標準品。貨期短，*，不需要客戶填寫詳細資料，幫客戶辦理一切海關手續，方便快捷！

LL/2 (LLC1)，ATCC細胞株，細胞培養的過程中，經常見到黑色的顆?；蛐『邳c，這種情況是怎么引起的呢？該怎么避免呢？

原因：

黑點，大概有細胞本身帶的，環境有的，還有人身上帶進細胞間的， 還有就是血清和培養基。

解決辦法：

1、如果小黑點有增殖趨勢，那么就有可能是污染了，需要處理；

2、如果小黑點沒有增殖趨勢，且不影響細胞生長，也不影響實驗的話，則可能

a、是「黑膠蟲」，黑膠蟲究竟是一種生物還是非生物，本身就存在爭議。有人認為是從血清中來的一種原蟲，也有人認為是細菌，或是真菌，也有人認為是血清中的蛋白的結晶?！负谀z蟲」可寄生于動物細胞，也可以生存于培養基中，依靠細胞和培養基中的營養為生，并隨細胞傳代而傳代?！负谀z蟲」與細胞競爭性生長，開始時對細胞并沒有什么影響，但當黑膠蟲的數量多到一定程度的時候， 細胞生長就會受到影響直至死亡，嚴重影響了科研活動的開展和進行。以前（這個至少是 10 年以前），很多實驗室在養細胞時用國產血清，那時的血清可能質量不過關，有所謂的「黑膠蟲」，但是也沒有明確的鑒定。但是現在的血清，即使國產的，如四季青等稍大點的廠家，產品里這種現象就少見了。

b、是細胞碎片，或血清里德沉淀析出，在做布朗運動。

c、是核糖體，也可能是雜質

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LL/2 (LLC1)，ATCC細胞株，傳代培養

懸浮細胞:

1.懸浮細胞常規傳代操作為半量換液，分瓶傳代，即取出一半細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中，添加適當的*培養基，于培養箱中培養；也可根據細胞密度分多瓶傳代。

2.注意培養基PH值變化情況，定期換液，待細胞密度達到70-80%時重復傳代操作或者凍存。

半貼壁半懸浮細胞：

1.若懸浮細胞較多且折光率良好，可離心收集，繼續培養。

2.若有少量細胞懸浮，也可不用收集，傳代操作按常規貼壁細胞操作流程處理。

3.若懸浮細胞較多，離心收集，原瓶中貼壁細胞按照常規規貼壁細胞操作流程進行消化、終止消化、吹打，并與之前收集的懸浮細胞混懸，分瓶培養。

貼壁細胞:

1.吸出原培養瓶中的培養基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加2~3 ml 含0.25% EDTA的胰酶進行消化（注意把握消化時間，通常控制在1~2min）

2.鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小時去掉胰酶，加6~8 ml *培養基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落、吹散；

3.取出部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中，添加適當的*培養基，于培養箱中培養；

4.注意培養基PH值變化情況，定期換液，待細胞密度達到70-80%以后重復傳代操作或者凍存。

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