聯(lián)系電話：
15821734033
服務(wù)熱線： 15821734033
服務(wù)熱線： 
A431細(xì)胞| A431細(xì)胞系 培養(yǎng)步驟
產(chǎn)品名稱：A431細(xì)胞
中文名稱：人表皮癌細(xì)胞；A431
規(guī)格：T25
供應(yīng)商：上海慧穎生物科技有限公司
復(fù)蘇周期：10個(gè)工作日左右
培養(yǎng)步驟：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL*培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1、對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的*培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞，*脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
PS：若客戶收到2ml小管細(xì)胞，收到細(xì)胞后，用75%酒精噴灑整個(gè)管子消毒后放到超凈臺(tái)或安全柜內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作；將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右*培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度：若密度未超過(guò)80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過(guò)80%，可直接進(jìn)行傳代（方法同上）。
2、對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，進(jìn)行離心收集，1000RPM條件下離心8-10分鐘，去除上清，按凍存數(shù)量加入血清及DMSO，凍存比例為90%FBS+10%DMSO。
PS：若客戶收到2ml小管細(xì)胞，收到細(xì)胞后，用75%酒精噴灑整個(gè)管子消毒后放到超凈臺(tái)或安全柜內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作；將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右*培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度：若密度未超過(guò)80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過(guò)80%，可直接進(jìn)行傳代（方法同上）。
慧穎生物是一家專業(yè)從事細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)產(chǎn)品的公司，擁有獨(dú)立細(xì)胞房（可隨時(shí)約定參觀），供應(yīng)胎牛血清，無(wú)血清細(xì)胞凍存液，無(wú)血清培養(yǎng)基，常規(guī)培養(yǎng)基，胰酶，雙抗，*培養(yǎng)基，STR鑒定細(xì)胞，感受態(tài)細(xì)胞等，專業(yè)，專注，性價(jià)比高，是您Shou選之家。
熱賣細(xì)胞：
細(xì)胞名稱 | 英文簡(jiǎn)稱 | 細(xì)胞類型 |
小鼠乳腺癌細(xì)胞熒光酶標(biāo)記 | 4T1-LUC | 細(xì)胞系 |
SD大鼠脂肪干細(xì)胞+RFP | 原代細(xì)胞-RFP | 原代細(xì)胞 |
綿羊肺成纖維細(xì)胞永生化細(xì)胞 | OAR-L1 | 原代細(xì)胞永生化 |
奶山羊乳腺上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞 |
| 原代細(xì)胞永生化 |
人膽囊上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞 | 原代SV40永生化 | 原代細(xì)胞永生化 |
人肺癌細(xì)胞紅色標(biāo)記 | A549-RFP | 細(xì)胞系 |
人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞永生化細(xì)胞 |
| 原代細(xì)胞永生化 |
人結(jié)腸癌紫杉醇耐藥株系 | HCT-15/Taxol | 細(xì)胞系耐藥株 |
人結(jié)直腸癌氟尿嘧啶耐藥株 | HCT-15/FU | 細(xì)胞系耐藥株 |
人類星形膠質(zhì)瘤耐替莫唑胺細(xì)胞 | U251MG/TMZ-luc | 細(xì)胞系 |
人類星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞 | U251MG/TMZ | 構(gòu)建耐藥株 |
人慢性骨髓性白血病細(xì)胞阿霉素 | K562/ADR | 細(xì)胞系耐藥株 |
人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤紅色標(biāo)記 | U-87MG-RFP | 細(xì)胞系 |
人皮膚成纖維細(xì)胞 | HSF | 原代細(xì)胞永生化 |
人臍靜脈內(nèi)皮綠色GFP標(biāo)記 | 原代細(xì)胞-GFP | 原代細(xì)胞 |
人臍靜脈內(nèi)皮紅色RFP標(biāo)記 | HUVEC-RFP | 細(xì)胞系 |
人臍靜脈內(nèi)皮綠色GFP標(biāo)記 | HUVEC-GFP | 細(xì)胞系 |
人臍靜脈內(nèi)皮 | HUV-EC-C | 細(xì)胞系 |
人前庭鞘膜瘤細(xì)胞永生化細(xì)胞 |
| 原代細(xì)胞永生化 |
人乳腺癌阿霉素耐藥細(xì)胞株 | Mcf-7/adr | 細(xì)胞系耐藥株 |
人乳腺癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 | MCF7-luc | 細(xì)胞系 |
人三陰性乳腺癌 | MDA-MB-231-luciferase | 細(xì)胞系 |
人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 | SH-SY5Y 轉(zhuǎn)染突變型 | 細(xì)胞系 |
人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 | SH-SY5Y 轉(zhuǎn)染野生型 | 細(xì)胞系 |
人胰腺癌細(xì)胞吉西他濱耐藥株 | PANC-1/GEM | 細(xì)胞系耐藥株 |
人胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤細(xì)胞永生化細(xì)胞 |
| 原代細(xì)胞永生化 |
人胰腺腫瘤細(xì)胞永生化細(xì)胞 |
| 原代細(xì)胞永生化 |
人胰腺腫瘤相關(guān)成纖維永生化細(xì)胞 |
| 原代細(xì)胞永生化 |
人轉(zhuǎn)移灶淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移腫瘤細(xì)胞永生化細(xì)胞 |
| 原代細(xì)胞永生化 |
人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞永生化細(xì)胞 |
| 原代細(xì)胞永生化 |
人子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞 |
| 原代細(xì)胞永生化 |
大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞永生化細(xì)胞 |
| 原代細(xì)胞永生化 |
小鼠肺成纖維細(xì)胞永生化細(xì)胞 |
| 原代細(xì)胞永生化 |
小鼠附睪脂肪干細(xì)胞永生化細(xì)胞 |
| 原代細(xì)胞永生化 |
小鼠肝癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 | HEPA1-6-LUC | 細(xì)胞系 |
小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞 | K7M2WT-LUC | 細(xì)胞系 |
小鼠腎小球系膜細(xì)胞永生化細(xì)胞 |
| 原代細(xì)胞永生化 |
小鼠胰腺星狀細(xì)胞永生化 |
| 原代細(xì)胞永生化 |
C57小鼠脂肪干細(xì)胞永生化細(xì)胞 |
| 原代細(xì)胞永生化 |
鴨腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞永生化細(xì)胞 |
| 原代細(xì)胞永生化 |
鴨胚成纖維細(xì)胞永生化 | Duck embryo | 原代細(xì)胞永生化 |
鴨胚肝間質(zhì)細(xì)胞永生化細(xì)胞 |
| 原代細(xì)胞永生化 |
羊睪丸間質(zhì)細(xì)胞永生化細(xì)胞 |
| 原代細(xì)胞永生化 |
湖羊瘤胃上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞 |
| 原代細(xì)胞永生化 |
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞 CHO-K1懸浮細(xì)胞 | CHO-K1懸浮細(xì)胞 | 馴化細(xì)胞系 |
豬（杜洛克，萊蕪）腹部脂肪干細(xì)胞永生化細(xì)胞 |
| 原代細(xì)胞永生化 |
豬扁桃體上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞 |
| 原代細(xì)胞永生化 |
豬肝星狀細(xì)胞永生化細(xì)胞 |
| 原代細(xì)胞永生化 |
豬骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞永生化細(xì)胞 |
| 原代細(xì)胞永生化 |
豬子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞 |
| 原代細(xì)胞永生化 |
豬鼻腔粘膜上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞 |
| 原代細(xì)胞永生化 |
兔肝臟間質(zhì)細(xì)胞永生化細(xì)胞 |
| 原代細(xì)胞永生化 |
技術(shù)支持：化工儀器網(wǎng) 管理登陸 網(wǎng)站地圖
