A375細(xì)胞| A375細(xì)胞系培養(yǎng)步驟

發(fā)布時(shí)間：2020-05-28瀏覽：3600次

A375細(xì)胞| A375細(xì)胞系培養(yǎng)步驟

產(chǎn)品名稱：A375細(xì)胞

中文名稱：人惡性黑色素瘤細(xì)胞；A375

規(guī)格：T25

供應(yīng)商：上海慧穎生物科技有限公司

復(fù)蘇周期：10個(gè)工作日左右

培養(yǎng)步驟：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL*培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1、對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的*培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細(xì)胞，*脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

PS：若客戶收到2ml小管細(xì)胞，收到細(xì)胞后，用75%酒精噴灑整個(gè)管子消毒后放到超凈臺或安全柜內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作；將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右*培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度：若密度未超過80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進(jìn)行傳代（方法同上）。

2、對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，進(jìn)行離心收集，1000RPM條件下離心8-10分鐘，去除上清，按凍存數(shù)量加入血清及DMSO，凍存比例為90%FBS+10%DMSO。

慧穎生物是一家專業(yè)從事細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)產(chǎn)品的公司，擁有獨(dú)立細(xì)胞房（可隨時(shí)約定參觀），供應(yīng)胎牛血清，無血清細(xì)胞凍存液，無血清培養(yǎng)基，常規(guī)培養(yǎng)基，胰酶，雙抗，*培養(yǎng)基，STR鑒定細(xì)胞，感受態(tài)細(xì)胞等，專業(yè)，專注，性價(jià)比高，是您Shou選之家。

熱賣細(xì)胞：

細(xì)胞名稱	英文簡稱	細(xì)胞類型
小鼠乳腺癌細(xì)胞熒光酶標(biāo)記	4T1-LUC	細(xì)胞系
SD大鼠脂肪干細(xì)胞+RFP	原代細(xì)胞-RFP	原代細(xì)胞
綿羊肺成纖維細(xì)胞永生化細(xì)胞	OAR-L1	原代細(xì)胞永生化
奶山羊乳腺上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞		原代細(xì)胞永生化
人膽囊上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞	原代SV40永生化	原代細(xì)胞永生化
人肺癌細(xì)胞紅色標(biāo)記	A549-RFP	細(xì)胞系
人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞永生化細(xì)胞		原代細(xì)胞永生化
人結(jié)腸癌紫杉醇耐藥株系	HCT-15/Taxol	細(xì)胞系耐藥株
人結(jié)直腸癌氟尿嘧啶耐藥株	HCT-15/FU	細(xì)胞系耐藥株
人類星形膠質(zhì)瘤耐替莫唑胺細(xì)胞	U251MG/TMZ-luc	細(xì)胞系
人類星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞	U251MG/TMZ	構(gòu)建耐藥株
人慢性骨髓性白血病細(xì)胞阿霉素	K562/ADR	細(xì)胞系耐藥株
人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤紅色標(biāo)記	U-87MG-RFP	細(xì)胞系
人皮膚成纖維細(xì)胞	HSF	原代細(xì)胞永生化
人臍靜脈內(nèi)皮綠色GFP標(biāo)記	原代細(xì)胞-GFP	原代細(xì)胞
人臍靜脈內(nèi)皮紅色RFP標(biāo)記	HUVEC-RFP	細(xì)胞系
人臍靜脈內(nèi)皮綠色GFP標(biāo)記	HUVEC-GFP	細(xì)胞系
人臍靜脈內(nèi)皮	HUV-EC-C	細(xì)胞系
人前庭鞘膜瘤細(xì)胞永生化細(xì)胞		原代細(xì)胞永生化
人乳腺癌阿霉素耐藥細(xì)胞株	Mcf-7/adr	細(xì)胞系耐藥株
人乳腺癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記	MCF7-luc	細(xì)胞系
人三陰性乳腺癌	MDA-MB-231-luciferase	細(xì)胞系
人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞	SH-SY5Y 轉(zhuǎn)染突變型	細(xì)胞系
人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞	SH-SY5Y 轉(zhuǎn)染野生型	細(xì)胞系
人胰腺癌細(xì)胞吉西他濱耐藥株	PANC-1/GEM	細(xì)胞系耐藥株
人胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤細(xì)胞永生化細(xì)胞		原代細(xì)胞永生化
人胰腺腫瘤細(xì)胞永生化細(xì)胞		原代細(xì)胞永生化
人胰腺腫瘤相關(guān)成纖維永生化細(xì)胞		原代細(xì)胞永生化
人轉(zhuǎn)移灶淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移腫瘤細(xì)胞永生化細(xì)胞		原代細(xì)胞永生化
人主動脈內(nèi)皮細(xì)胞永生化細(xì)胞		原代細(xì)胞永生化
人子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞		原代細(xì)胞永生化
大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞永生化細(xì)胞		原代細(xì)胞永生化
小鼠肺成纖維細(xì)胞永生化細(xì)胞		原代細(xì)胞永生化
小鼠附睪脂肪干細(xì)胞永生化細(xì)胞		原代細(xì)胞永生化
小鼠肝癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記	HEPA1-6-LUC	細(xì)胞系
小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞	K7M2WT-LUC	細(xì)胞系
小鼠腎小球系膜細(xì)胞永生化細(xì)胞		原代細(xì)胞永生化
小鼠胰腺星狀細(xì)胞永生化		原代細(xì)胞永生化
C57小鼠脂肪干細(xì)胞永生化細(xì)胞		原代細(xì)胞永生化
鴨腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞永生化細(xì)胞		原代細(xì)胞永生化
鴨胚成纖維細(xì)胞永生化	Duck embryo	原代細(xì)胞永生化
鴨胚肝間質(zhì)細(xì)胞永生化細(xì)胞		原代細(xì)胞永生化
羊睪丸間質(zhì)細(xì)胞永生化細(xì)胞		原代細(xì)胞永生化
湖羊瘤胃上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞		原代細(xì)胞永生化
中國倉鼠卵巢細(xì)胞 CHO-K1懸浮細(xì)胞	CHO-K1懸浮細(xì)胞	馴化細(xì)胞系
豬（杜洛克，萊蕪）腹部脂肪干細(xì)胞永生化細(xì)胞		原代細(xì)胞永生化
豬扁桃體上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞		原代細(xì)胞永生化
豬肝星狀細(xì)胞永生化細(xì)胞		原代細(xì)胞永生化
豬骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞永生化細(xì)胞		原代細(xì)胞永生化
豬子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞		原代細(xì)胞永生化
豬鼻腔粘膜上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞		原代細(xì)胞永生化
兔肝臟間質(zhì)細(xì)胞永生化細(xì)胞		原代細(xì)胞永生化

上一篇：A431細(xì)胞| A431細(xì)胞系培養(yǎng)步驟
下一篇：A3細(xì)胞| A3細(xì)胞系培養(yǎng)步驟

A375細(xì)胞| A375細(xì)胞系 培養(yǎng)步驟

咨詢在線客服

A375細(xì)胞| A375細(xì)胞系培養(yǎng)步驟