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HEK-293,人胚腎細胞 消化要有個度

發布時間:2018-07-02瀏覽:1429次

HEK-293人胚腎細胞 消化要有個度

產品代號:HEK-293

中文名稱:人胚腎細胞

種屬:人

是否鑒定:已鑒定

庫存狀態:現貨

 

慧穎生物提供2000種類細胞株細胞系,400多株已鑒定細胞,涉及種屬:人,大鼠,小鼠,兔子,魚,牛,倉鼠等,我們提供好的產品,好的服務,好的技術,復蘇周期短,*,細胞狀態良好,飽滿,有光澤,無支原體。

 

HEK-293人胚腎細胞 消化要有個度

細胞培養,尤其是細胞系的培養,就細胞消化而言,多做、善于總結,就可以把細胞養的越來越好

絕大部分細胞消化只要用胰酶潤洗一遍即可:

吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化。

什么算是消化好了呢?

不需要把細胞全部消化成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經可以了。

一般能移動了,說明細胞與培養基質材料的附著已經消失了,細胞之間的附著也已經消失了,細胞已經獨立分布了(雖然沒有呈現很廣的離散分布)。這個時候應該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。

細胞就是*成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。

一些懸浮培養細胞也是如此,容易聚集,不要過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液。細胞只要能從基質上脫離下來,即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次(一般10次即可),成小規模聚集(10個細胞左右)是正常的,不要再去延長消化時間,等待單細胞懸液出現。

比較難消化的細胞:

潤洗方法5min還不能消化,以結腸癌細胞為例,比如HCT15、LS411和KM12細胞,胰酶消化,一般10 cm 培養皿,一次多加入300ul-500ul就足夠了。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,用胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。

 

常規的細胞實驗,受消化影響不是很大:

如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化的話(難消化細胞例外)。但少數實驗,比如病毒包裝,對細胞代數,對細胞狀態要求*。這個時候,胰酶消化,就是潤洗,都會對細胞包裝病毒的能力有影響,傳代次數一多,細胞包裝能力就會逐漸下降。這個時候都不用胰酶消化,用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響細胞外基質相關酶的活性,來使得細胞脫離基質附著表面,但不切割任何蛋白。

 

EDTA的作用:

許多人不用胰酶,只用EDTA,或者用胰酶/EDTA聯合作用。這里要明白,胰酶切割細胞外基質的一些負責粘連和附著的蛋白,而EDTA通過螯合Ca離子,作用于整聯蛋白的活性,所以EDTA的作用更加溫和。有的人在胰酶里添加一些EDTA,或者對付特別難消化的細胞,添加多一些EDTA,就是這個道理。一般不要試圖延長消化時間(如果10min還消化不*的話),而應該想其它辦法。

 

PBS洗滌:

消化之前用PBS洗滌,是常見的操作,因為血清中含有抑制胰酶的蛋白。對于一些難消化細胞,可以配制不含Ca,Mg離子的PBS,因為這些離子也會抑制胰酶的活性。但對于絕大部分細胞用胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化,不需要配制不含Ca,Mg離子的溶液。

細胞代號         細胞名稱         種屬         鑒定結果

HEK-293人胚腎細胞 消化要有個度

編號 中文名稱  是否鑒定

5637         人膀胱癌細胞             

7703         人肝癌細胞         

143B         人骨肉瘤細胞             

22RV1      人前列腺癌細胞         

293FT       人胚腎細胞         

293T         人胚腎細胞         

435S          人乳腺癌細胞/人黑素瘤細胞            

453  人乳腺癌細胞             

6T-CEM    T細胞白血病細胞         

769-P        人腎細胞腺癌細胞             

786-O       人腎透明細胞腺癌細胞             

95-D          人高轉移肺癌細胞             

97H  人高轉移性肝癌細胞         

A172         人膠質母細胞瘤細胞         

A2058       人黑色素瘤細胞         

A2780       人卵巢癌細胞             

A375         人黑色素瘤細胞株             

A431         人表皮癌細胞             

A498         人腎癌細胞         

A549         人非小細胞肺癌細             

A-673        人橫紋肌肉瘤細胞             

ACHN       人腎細胞腺癌細胞             

AGS  人胃腺癌細胞             

AN3CA     人子宮內膜腺癌(轉移)細胞      

ARH-77    人漿細胞白血病         

ARO 沒有,找不到信息             

ARPE-19   人視網膜上皮細胞             

B-CPAP     人甲狀腺癌細胞         

BEAS-2b   人正常肺上皮細胞             

BEWO       人絨毛膜腫瘤細胞             

BGC-823  人胃腺癌細胞(低分化)              

BT-474     人乳腺導管癌細胞             

BT-549     人乳腺管癌細胞         

BXPC-3     人原位胰腺腺癌細胞         

C-33 A      人子宮頸癌細胞         

C643         人甲狀腺癌細胞         

C8166       T淋巴細胞白血病細胞        

Ca Ski        人宮頸癌腸轉移細胞/人宮頸癌上皮細胞       

Caco2       人結直腸腺癌細胞            

CAKI-1      人腎透明細胞癌皮膚轉移細胞         

cal-27       人舌鱗癌細胞             

CALU-1     人肺癌細胞         

CALU-3     人肺腺癌細胞(胸水)           

CCD-1095SK     人乳腺浸潤性導管癌旁皮膚細胞             

CCRF-CEM        人急性淋巴細胞白血病T淋巴細胞         

CEM/C1   人急性淋巴細胞白血病細胞             

CFPAC-1   人胰腺癌細胞             

CNE1        人鼻咽癌細胞            

CNE2        人鼻咽癌細胞            

COLO 205         人結腸癌細胞             

COLO 320DM  人結直腸腺癌細胞             

CW-2        人結腸腺癌細胞         

DAOY        Daoy細胞,具體不清楚            

DAUDI      Burkitt's淋巴瘤細胞     

DETROIT 562   人咽頭癌胸水轉移細胞             

DLD-1       人結直腸腺癌上皮細胞             

DU 145     人前列腺癌細胞         

EA.HY926         人臍靜脈細胞融合細胞             

ECV304    人臍靜脈內皮細胞             

ES-2 人卵巢透明細胞癌細胞            

FADU        人咽鱗癌細胞             

FTC-133   人濾泡性甲狀腺癌細胞             

GBC-SD    人膽囊癌細胞             

GCIY                       

H1299      人非小細胞肺癌細胞         

H1395      人肺腺癌細胞             

H1650      人非小細胞肺癌細胞         

H1703      人肺鱗癌細胞             

H1755      人肺癌細胞       

H1944      人非小細胞肺癌細胞         

H1975      人肺腺癌細胞             

H2170      人肺鱗癌細胞             

H226         人肺鱗癌細胞             

H292         人肺癌細胞(淋巴結轉移)           

H358         人非小細胞肺癌細胞       

H460         人大細胞肺癌細胞            

H520         人肺鱗癌細胞            

H596         人肺腺鱗癌細胞         

H661         人大細胞肺癌細胞             

H716         人結直腸腺癌細胞             

H838         人非小細胞肺癌細胞         

Hacat       人永生化角質形成細胞             

HBE 人支氣管上皮樣細胞         

HBL-100   人整合SV40基因的乳腺上皮細胞           

HCC1937 人乳腺癌細胞             

HCC827   人非小細胞肺癌細胞         

HCCC-9810      人膽管細胞型肝癌細胞             

HCCLM3  人高轉移肝癌細胞             

HCT-116  人結腸癌細胞             

HCT-8       人回盲腸癌細胞         

HEC-1-A   人子宮內膜腺癌細胞         

HEC-1-B   人子宮內膜腺癌細胞         

HEK-293   人胚腎細胞         

HEL  人紅白細胞白血病細胞           

HELA229  人宮頸癌復蘇細胞             

Hela-J                    

Hep G2     人肝癌細胞         

HEP-2       人喉表皮樣癌細胞            

HEP3B      人肝癌細胞         

HEY          人卵巢癌細胞             

HFF  人包皮成纖維細胞            

HFL1         人胚肺成纖維細胞             

HFOB1.19         SV40轉染成骨細胞               

HGC-27    人胃癌細胞(未分化)         

HK-2          人腎皮質近曲小管上皮細胞             

HL-60        人原髓細胞白血病細胞            

HMEC-1   人微血管內皮細胞            

HO-8910  人卵巢癌細胞             

HPN1                    

HS683       細胞人腦視神經膠質瘤細胞            

Hs888Lu  人肺成纖維細胞         

HT-1080   人纖維肉瘤細胞         

HT-29       人結腸癌細胞            

HT-3                       

HTR8        人滋養細胞         

HUCCT1   膽管上皮癌細胞              

HuH-6       人肝母細胞瘤細胞         

HUH-7      人肝癌細胞         

HUT78      T淋巴細胞白血病細胞         

HUVEC-C 人臍靜脈內皮細胞             

ISK                 

JAR                

JEG-3                     

JEKO-1                   

JurkatClone E6-1              

K-562                     

KATO III                 

KLE                

KTC-1                     

KU812                    

KYSE-150               

LI-7                

LNcap clone FGC                   

L-O2              

LOVO                     

LS 174T                  

MCF10A                

MCF-7                    

MDA-MB-231               

MDA-MB-231(DMEM)                  

MDA-MB-231(L-15)              

MDA-MB-436               

MDA-MB-468               

MG-63                   

MGC-803              

MIA PaCa-2                   

MM.1S                  

MNNG/HOS Cl #5                  

MRC-5                   

MV4-11                 

N87               

NCI-H1299                     

NCI-H1563                     

NCI-H2452                     

NCI-H647                       

NK-92                     

NTHY-ORI-31                

OCM1A                 

OS-RC-2                 

OVCAR-3               

PANC-1                  

PC-3              

PC-3M                   

PC-9              

PLC/PRF/5                      

Raji                

RBE               

RD                 

RKO               

RL95-2                   

RT4               

RWPE-1                 

SAOS-2                   

SH-SY5Y                 

SiHa              

SJCRH30               

SK-BR-3                 

SK-HEP-1               

SK-MES-1              

SK-N-BE(2)                     

SK-NEP-1               

SK-N-SH                 

SK-OV-3                

SPC-A-1                 

SU-DHL-6              

SV-HUC-1                       

SW 1990                

SW1353                     

SW480                   

SW579                   

SW620                   

SW-620                  

SW839                   

SW982                   

T/G HA-VSMC               

T-24              

T47D                      

T82                

T84                

TCA-8113                       

TE 353.Sk                      

TE-1              

THP-1                     

TMK1                     

TPC-1                     

TT                  

TTA1                       

U-118MG                       

U-2 OS                   

U251                      

U87                       

U-87MG                

U-937                     

UM-UC-3              

VCAP                      

WERI-RB-1                     

WI-38                     

WISH                      

WPMY-1                    

ZR-75-1                 

ZR-75-30               

 

 

 

 

 

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